質(zhì)粒DNA抽提

質(zhì)粒DNA抽提:

    通常是指從大腸桿菌中進(jìn)行小量質(zhì)粒的快速抽提的方法，通過試劑盒采用新型的離子交換柱，在特定條件下，使質(zhì)粒能在離心過柱的瞬間，結(jié)合到質(zhì)粒純化柱上，在一定條件下又能將質(zhì)粒充分洗脫，從而實(shí)現(xiàn)質(zhì)粒的快速純化。無需酚氯仿抽提，無需酒精沉淀，12個(gè)樣品只需不足30分鐘即可完成。

質(zhì)粒DNA抽提效率:
    1.每個(gè)質(zhì)粒純化柱可以結(jié)合的質(zhì)粒量的上限約為20微克。

    2.每個(gè)純化柱可用于抽提1-5毫升用LB培養(yǎng)的大腸桿菌。

    3.抽提所得質(zhì)粒的OD值一般在1.80左右。

    4.抽提獲得的質(zhì)粒量會受質(zhì)粒拷貝數(shù)等因素影響。

    5.抽提獲得的質(zhì)粒DNA的OD值也會因菌種不同等原因而略有波動。

用途：
   質(zhì)粒可直接用于轉(zhuǎn)染細(xì)胞，DNA測序，PCR，基于PCR的突變，體外轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)化細(xì)菌，內(nèi)切酶消化等。

所需試劑：溶液I（懸浮液），溶液II（裂解液），溶液III（結(jié)合液），溶液IV（洗滌液），溶液V（洗脫液），RNase A（100mg/ml），質(zhì)粒純化柱，廢液收集管等

保存條件：
    室溫保存，一年有效。

注意事項(xiàng)： 
    1.*次使用前把試劑盒提供的RNase A全部加到溶液I（懸浮液）中，混勻，并在瓶上做好標(biāo)記。加入RNase A后4℃存放。
    2.*次使用前在每瓶溶液IV（洗滌液）中加入54ml無水乙醇，混勻，并在瓶上做好標(biāo)記。
    3.溫度較低時(shí)，溶液II和溶液III可能會有沉淀產(chǎn)生。使用前必須檢查一遍。如有沉淀，37℃水浴加熱溶解，混勻后使用。溶液II請勿過分劇烈混勻，否則會產(chǎn)生大量氣泡。
    4.溶液II使用完后，一定要蓋緊瓶蓋，防止被空氣中二氧化碳酸化。
    5.溶液II有強(qiáng)堿性，溶液II和溶液III對人體都有刺激性，操作時(shí)請小心，并注意適當(dāng)防護(hù)。
    6.所有操作均在室溫進(jìn)行，操作時(shí)無需冰浴。所有離心也均在室溫進(jìn)行。
    7.廢液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丟棄。
    8.為了安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。